ارزیابی پروتئین نوترکیب nc1gra7 در تشخیص آنتی-بادی های ضد نئوسپورا کانینوم در گاو و گاومیش به روش الایزا

thesis
abstract

نئوسپورا کانینوم تک یاخته ای از شاخه اپی کمپلکسا بوده و طیف وسیعی از حیوانات خونگرم را آلوده می کند و عامل مهم سقط در گاو می باشد. آنتی ژن گرانول متراکم 7(ncgra7) یک پروتئین ایمونودامینانت مهم و قابل اعتماد در تشخیص نئوسپوروزیس در گاو می باشد. هدف از تحقیق حاضر، تولید آنتی ژن نوترکیب ncgra7 و استفاده از آن در تدوین آزمایش الایزا و مقایسه ارزش تشخیصی آن با کیت تجاری الایزا می باشد. بدین منظور قطعه ای از dna انگل مربوط به gra7 با استفاده از آزمون pcr تکثیر یافت. پس از تأیید ردیف نوکلئوتید ی محصول pcr در پلاسمید pmal-c2xکلون و پروتئین در باکتری e.coli سویه tg1 بیان و با وسترن بلات تأیید شد. پس از خالص سازی پروتئین نوترکیب ncgra7 با استفاده از رزین آمیلوز و تعیین غلظت پروتئین نوترکیب، آزمایش الایزا با استفاده از آنتی ژن نوترکیب ncgra7 جهت تشخیص آنتی بادی ضد نئوسپورا کانینوم برای سرم های گاو و گاومیش طراحی گردید. تیتر آنتی بادی 108 سرم گاو و 122 سرم گاومیش با استفاده از الایزا های استاندارد شده با ncgra7 و کیت تجاری الایزای(idexx) تعیین گردید. حساسیت و ویژگی این تست برای الایزا های طراحی شده با ncgra7 برای سرم های گاومیش به ترتیب90 و 97 درصد و برای سرم های گاو به ترتیب 91 و 94 درصد بود. شیوع سرمی نئوسپورا کانینوم در 108 نمونه سرم های گاو جمع آوری شده از اطراف اهواز در کیت الایزای تجاری idexx ، 70/53 درصد و در الایزای طراحی شده ncgra7، 85/51 درصد بود و در 122 نمونه سرمی گاومیش در کیت الایزای تجاری idexx و الایزای طراحی شده با ncgra7 به ترتیب 55/56 و 37/57 درصد بود. اختلاف معنی داری بین دو تست کیت الایزای تجاری idexx و الایزای طراحی شده با ncgra7 مشاهده نشد (05/0> p). درجه تطابق تقریباً کاملی بین نتایج دو تست در الایزا های طراحی شده برای گاو و گاومیش وجود داشت. آماره کاپا در الایزای طراحی شده برای سرم های گاو 85/0 و در الایزای طراحی شده برای سرم های گاومیش83/0 بود (001/0> p). نتایج نشان داد که الایزای طراحی شده بر اساس آنتی ژن نوترکیب ncgra7 تستی قابل اعتماد برای تشخیص آنتی بادی اختصاصی در آلودگی نئوسپورا کانینوم تحت شرایط مزرعه به نظر می رسد.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

ردیابی آنتی بادی علیه نئوسپورا کانینوم در سرم های تجاری جنین گاو (fbs) با استفاده از روش الایزا

نئوسپورا کانینوم انگلی با انتشار جهانی وعامل سقط جنین در گاو است که منجر به خسارات اقتصادی در صنعت گاوداری می شود. در این مطالعه تعداد 10 مجموعه شماره سرم تجاری جنین گاو در دسترس و نیز 16 مجموعه شماره سرم جنین گاو که مراحل تحقیقاتی و تولید اولیه را سپری می نمودند، از نظر آلودگی به نئوسپورا کانینوم با استفاده از کیت تشخیص آنتی بادی مورد بررسی قرار گرفتند. 100 درصد سرم های تجاری جنین گاو با منشا ...

full text

ارزیابی حضور آنتی بادی ضد نئوسپورا کانینوم در شیر خام گاوهای شهرستان کاشان

سابقه و هدف: نئوسپوروزیس به ­وسیله تک ­یاخته انگلی به­نام نئوسپورا کانینوم ایجاد می شود. این انگل قادر است گونه­ های مختلفی از حیوانات اهلی و وحشی را آلوده کند. برخی مطالعات احتمال آلوده شدن انسان به این انگل را گزارش کرده­اند. هدف از این مطالعه تعیین وجود آنتی­بادی ضد نئوسپورا در شیر خام گاوهای شهرستان کاشان بود. مواد و روش ­ها: از دو دامداری صنعتی شهرستان کاشان 187 نمونه شیر جمع ­آوری شد. نژا...

full text

فراوانی آنتی بادی ضد نئوسپورا کانینوم در نمونه‌های شیر تعدادی از گاوداری‌های شهرستان شهریار

نئوسپورا کانینوم انگل داخل سلولی اجباری از شاخه آپی‌کمپلکسا بوده و باعث سقط جنین در گاو و فلج عصبی عضلانی در سگ می‌گردد. با توجه به ضررهای اقتصادی وارده به صنعت دامپروری در اثر سقط جنین و کاهش تولید شیر ناشی از نئوسپورا کانینوم، فراوانی این تک یاخته در گاوهای شیری منطقه شهریار مورد ارزیابی قرار گرفت . با توجه به پراکندگی دامی 150 نمونه شیرخام از 5 دامداری گاو شیری از 4 منطقه شهریار جمع آوری و ب...

full text

ردیابی آنتی‌بادی علیه نئوسپورا کانینوم در سرم‌های تجاری جنین گاو (FBS) با استفاده از روش الایزا

نئوسپورا کانینوم انگلی با انتشار جهانی وعامل سقط جنین در گاو است که منجر به خسارات اقتصادی در صنعت گاوداری می‌شود. در این مطالعه تعداد 10 مجموعه شماره سرم تجاری جنین گاو در دسترس و نیز 16 مجموعه شماره سرم جنین گاو که مراحل تحقیقاتی و تولید اولیه را سپری می‌نمودند، از نظر آلودگی به نئوسپورا کانینوم با استفاده از کیت تشخیص آنتی‌بادی مورد بررسی قرار گرفتند. 100 درصد سرم‌های تجاری جنین گاو با منشا ...

full text

طراحی روش دات- الایزا جهت تشخیص آلودگی به نئوسپورا کانینوم در گاو و مقایسه آن با کیت تجاری الایزا

نئوسپورا کانینوم تک یاخته ای از شاخه آپی کمپلکسا و یک عامل مهم سقط در گاو است که موجب بروز خسارات اقتصادی قابل توجهی در تمام دنیا می شود. گاو میزبان واسط مهمی برای نئوسپورا کانینوم می باشد. در این مطالعه ابتدا با کل تاکی زوئیت نئوسپورا کانینوم، روش الایزای نقطه ای استاندارد شد و سپس تعداد 178 نمونه سرم گاو که با روش الایزای غیر مستقیم مورد بررسی قرار گرفته بودند با روش دات الایزا مورد ارزیابی ق...

15 صفحه اول

طراحی روش الایزا جهت سنجش آنتی بادی ضد استرپتولیزین- o بر پایه پروتئین نوترکیب استرپتولیزین- o

سابقه و هدف: باکتری استرپتوکوک بتا همولیتیک گروه a اصلی ترین عامل عفونت های گوش و حلق و بینی می باشد. عدم درمان یا تاخیر در اقدامات درمانی، منجر به اختلالات جدی مانند تب روماتیسمی حاد و گلومرونفریت می شود. اندازه گیری آنتی بادی ضد استرپتولیزین- o به عنوان یک مارکر در تشخیص این عفونت کاربرد دارد. تهیه استرپتولیزین از محیط کشت باکتری وقت گیر و هم راه با آلودگی است. در این مطالعه جهت اندازه گیری آ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023